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多维预混合饲料中维生素E的测定


发表日期:2012/5/31  人气:1192     录入:admin

测定多维预混合饲料中的维生素E有多种的方法。最常用的方法一般会使用将样品进行皂化,然后用溶剂进行萃取,挥发溶剂后再进行稀释,配制到一定的浓度,再进行HPLC的分析。k4E中国饲料行业信息网-立足饲料,服务畜牧

我们先来讨论一下皂化的作用。皂化是一种化学反应,是酯类化合物和强碱反应,生成醇和酸的反应,生成的酸再和强碱反应生成盐和水。在饲料的分析中不是利用反应的生成物,而是有以下的作用:k4E中国饲料行业信息网-立足饲料,服务畜牧

对于用明胶包膜的维生素组分,可以打开明胶包膜,使内容物溶出。k4E中国饲料行业信息网-立足饲料,服务畜牧

对于脂溶性维生素,通过萃取可以去除一部分杂质。k4E中国饲料行业信息网-立足饲料,服务畜牧

可以在分析低含量脂溶性维生素样品时,浓缩组分。k4E中国饲料行业信息网-立足饲料,服务畜牧

从上面的论述中我们可以了解到,皂化反应在分析维生素E组分时,可以起去除一部分杂质,在分析低含量样品时可以起到浓缩组分的作用。在进行皂化反应和萃取的过程中,操作的难度较高,影响准确度的因素很多,如果操作者不熟练的话,则会得到偏低的结果,甚至测不出维生素E来。因为维生素E醋酸酯经皂化后会变成生育酚,而酚羟基从理论上说是带有酸性的,极易破坏。所以化验员要进行反复的练习后,并经过回收率的测试后,才能进行样品的分析操作。对于多维预混合饲料中的维生素E,一般来说含量比较高,杂质的干扰也可以忽略。因此,下面推荐一种直接萃取的方法来进行分析,操作简单准确度很高;k4E中国饲料行业信息网-立足饲料,服务畜牧

多维预混料中维生素E醋酸酯的测定k4E中国饲料行业信息网-立足饲料,服务畜牧

试验方法  k4E中国饲料行业信息网-立足饲料,服务畜牧

除特别注明外,试验中所用试剂均为分析纯,水为相应纯度的水,溶液为水溶液,试验仪器为一般实验室设备。k4E中国饲料行业信息网-立足饲料,服务畜牧

试剂和溶液:甲醇(HPLC级)、维生素E醋酸酯对照品k4E中国饲料行业信息网-立足饲料,服务畜牧

标准溶液的制备:称取维生素E醋酸酯对照品约100mg(准确到0.0001g),置于100mL棕色容量瓶中,用甲醇溶解并定容,摇匀后再精密吸取10.00mL置于另一100mL棕色容量瓶中,用甲醇定容。浓度约为100μg/mL。k4E中国饲料行业信息网-立足饲料,服务畜牧

维生素预混料样品溶液的制备:称取预混料约1g(精确到0.0001g)于100mL的容量瓶中,加入甲醇约70mL,置于50℃超声波水浴中处理20min,冷至室温后用甲醇定容,充分摇匀。再取部分溶液用甲醇进行稀释,最终浓度约在50~120μg/mL,取部分溶液离心,上层清液通过0.45μm滤膜过滤后,用于HPLC测定。

进样:将标准溶液和试样溶液各50μL依次注入仪器进行分析。(进样量可以根据不同的仪器自行调整)k4E中国饲料行业信息网-立足饲料,服务畜牧

色谱条件k4E中国饲料行业信息网-立足饲料,服务畜牧

色谱柱:Lichrospher100RP-8,C8,5μm,250mm×4.0mmk4E中国饲料行业信息网-立足饲料,服务畜牧

流动相:甲醇(HPLC级)k4E中国饲料行业信息网-立足饲料,服务畜牧

流速:1.0mL/mink4E中国饲料行业信息网-立足饲料,服务畜牧

进样量:50μLk4E中国饲料行业信息网-立足饲料,服务畜牧

检测波长:285nmk4E中国饲料行业信息网-立足饲料,服务畜牧

运行时间:约7mink4E中国饲料行业信息网-立足饲料,服务畜牧

分析结果的计算:k4E中国饲料行业信息网-立足饲料,服务畜牧

样品中所含维生素E(mg/g)的效价可依照下式计算:Cst×Wst×As×nsk4E中国饲料行业信息网-立足饲料,服务畜牧

式中:Cst—维生素E对照品的含量,%;Wst—维生素E对照品的质量,mg;Ast—维生素E对照品的峰面积;As—样品溶液的维生素E峰面积;nst—维生素E标准溶液的稀释倍数;ns—样品溶液的稀释倍数;W—样品的质量,g。k4E中国饲料行业信息网-立足饲料,服务畜牧

注:如果样品中杂质太多,在高效液相色谱中与维生素E分离不完全,则应采用皂化的分析方法进行分析。k4E中国饲料行业信息网-立足饲料,服务畜牧

使用直接萃取的本方法进行多维预混料中维生素E醋酸酯的分析,其回收率可以高达95%以上,准确度非常的高。k4E中国饲料行业信息网-立足饲料,服务畜牧

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